Vijesti

Dom / Vijesti / Metoda predtretmana za uklanjanje ometajućih tvari u krvi

Metoda predtretmana za uklanjanje ometajućih tvari u krvi

Objavio Administrator | 01 Mar

Općenito govoreći, zbog složenog sastava krvi, mnoge tvari, posebice plazma ili serum viših životinja, imaju jak interferentni učinak na reakciju između TAL (LAL) reagensa i endotoksina. Stoga, kada testiramo endotoksin takvih uzoraka, prije testiranja moramo ukloniti ometajuće tvari.

Trenutno interferirajuće tvari u plazmi uglavnom uključuju različite inhibitore proteaze, proteine ​​koji vežu endotoksine i inhibitore plazminogena. Za kolorimetriju, faktor Xa može razgraditi Boc-LEU-Gly-Arg-PNA peptidni lanac. Stoga je prije određivanja potrebno eliminirati ove interferirajuće tvari.

Metode predtretmana za uklanjanje ometajućih tvari u krvi su sljedeće:

(1) Metoda zagrijavanja razrjeđivanjem: plazma se razrijedi 3~10 puta s otopljenom vodom, a zatim se zagrijava u vodi od 37~100 ℃. Vrijeme držanja je općenito 5~10 minuta;

(2) Metoda ekstrakcije kloroformom: dodajte istu količinu kloroforma u plazmu i vibrirajte 3 sata, zatim uzmite gornji sloj za detekciju;

(3) Metoda obrade eterom: dodajte eter u plazmu za liječenje i uklonite eter na 40 ℃;

(4) Metoda s trifluoroctenom kiselinom: dodajte octenu kiselinu u plazmu da namjestite pH na 4,0, a zatim upotrijebite K2HPO4 da namjestite pH na 7~7,5;

(5) Metoda obrade surfaktanta: poput metode zagrijavanja razrjeđivanja, samo se voda za razrjeđivanje mijenja u surfaktant;

(6) Gel filtracija;

(7) Metoda alkalne obrade: plazma je držana na 0,2 NNaOH 37 ℃ 10 minuta i zatim neutralizirana s HCl;

(8) Metoda perklorne kiseline (PCA) ili nova metoda perklorne kiseline (New PCA);

(9) Metoda kuglica: stavite posebnu smolu koja apsorbira endotoksin u plazmu, izvadite je i dodajte LAL reagens za reakciju.

Među tim metodama, najčešće korištene metode su metoda ekstrakcije kloroformom, metoda zagrijavanja razrjeđivanja, metoda perklorne kiseline (PCA) i nova metoda perklorne kiseline (New PCA). O prve dvije metode potrebno je raspravljati tijekom određivanja zbog postojanja stope oporavka endotoksina, lažno pozitivnih rezultata i drugih problema. PCA metoda (New PCA method), zbog dobre stope oporavka dodanog endotoksina, trenutno se uglavnom koristi u pretkliničkom liječenju u Japanu.

\

Contact Us

*We respect your confidentiality and all information are protected.