Općenito govoreći, zbog složenog sastava krvi, mnoge tvari, posebice plazma ili serum viših životinja, imaju jak interferentni učinak na reakciju između TAL (LAL) reagensa i endotoksina. Stoga, kada testiramo endotoksin takvih uzoraka, prije testiranja moramo ukloniti ometajuće tvari.
Trenutno interferirajuće tvari u plazmi uglavnom uključuju različite inhibitore proteaze, proteine koji vežu endotoksine i inhibitore plazminogena. Za kolorimetriju, faktor Xa može razgraditi Boc-LEU-Gly-Arg-PNA peptidni lanac. Stoga je prije određivanja potrebno eliminirati ove interferirajuće tvari.
Metode predtretmana za uklanjanje ometajućih tvari u krvi su sljedeće:
(1) Metoda zagrijavanja razrjeđivanjem: plazma se razrijedi 3~10 puta s otopljenom vodom, a zatim se zagrijava u vodi od 37~100 ℃. Vrijeme držanja je općenito 5~10 minuta;
(2) Metoda ekstrakcije kloroformom: dodajte istu količinu kloroforma u plazmu i vibrirajte 3 sata, zatim uzmite gornji sloj za detekciju;
(3) Metoda obrade eterom: dodajte eter u plazmu za liječenje i uklonite eter na 40 ℃;
(4) Metoda s trifluoroctenom kiselinom: dodajte octenu kiselinu u plazmu da namjestite pH na 4,0, a zatim upotrijebite K2HPO4 da namjestite pH na 7~7,5;
(5) Metoda obrade surfaktanta: poput metode zagrijavanja razrjeđivanja, samo se voda za razrjeđivanje mijenja u surfaktant;
(6) Gel filtracija;
(7) Metoda alkalne obrade: plazma je držana na 0,2 NNaOH 37 ℃ 10 minuta i zatim neutralizirana s HCl;
(8) Metoda perklorne kiseline (PCA) ili nova metoda perklorne kiseline (New PCA);
(9) Metoda kuglica: stavite posebnu smolu koja apsorbira endotoksin u plazmu, izvadite je i dodajte LAL reagens za reakciju.
Među tim metodama, najčešće korištene metode su metoda ekstrakcije kloroformom, metoda zagrijavanja razrjeđivanja, metoda perklorne kiseline (PCA) i nova metoda perklorne kiseline (New PCA). O prve dvije metode potrebno je raspravljati tijekom određivanja zbog postojanja stope oporavka endotoksina, lažno pozitivnih rezultata i drugih problema. PCA metoda (New PCA method), zbog dobre stope oporavka dodanog endotoksina, trenutno se uglavnom koristi u pretkliničkom liječenju u Japanu.