Stolna centrifuga za smrzavanje niske brzine koristi se u laboratoriju za primarno odvajanje i ekstrakciju bioloških makromolekula, sedimenata itd. Njena zakretna glava uglavnom je izrađena od aluminijske legure, koja je plosnatog i kutnog tipa. Centrifugalna cijev izrađena je od tvrdog stakla, polietilenske tvrde plastike i cijevi od nehrđajućeg čelika. Centrifuga je opremljena pogonskim motorom, mjeračem vremena, regulatorom (pokazivač brzine) i rashladnim sustavom (podesivi temperaturni raspon je - 20~ 40 ℃), koji može zamijeniti rotirajuće glave s različitim kapacitetima i različitim vrstama brzina vrtnje prema za potrebe centrifugalnog materijala.

Detaljni koraci centrifugiranja za ekstrakciju citoplazmatskih i nuklearnih proteina stolnom centrifugom za smrzavanje male brzine:

1. Odredite stanje rasta stanica. Stanje rasta stanica mora biti 80% ili bolje:

2. Centrifugirajte na 1500 o/min 5 minuta

3. Odbacite supernatant, isperite stanice jednakim volumenom hladnog PBS-a i ponovite 3 puta kao u koraku 2

4. U skladu s procijenjenom količinom taloženja, dodajte 5 puta veći volumen izotoničkog sisbuffera u stanične čestice kako bi stanice lagano suspendirale i izbjegle pjenu što je više moguće

5. Dodajte pufer za lizu u suspendirane stanice i stavite na led 15 minuta kako bi se stanice proširile, što se može provjeriti mikroskopom

6. Za ekspandirane stanice u staničnom pokusu dodajte 10% IGEPALCA-630 kako bi konačna koncentracija dosegla 0,3%, dobro promiješajte i lagano dodajte

7. Odmah centrifugirajte (koristite EP epruvetu od 1,5 ml pri 5500 okr/min 30 s za velike količine; koristite epruvetu od 50 ml pri 5500 okr/min 2 minute za velike količine)

8. Prenesite supernatant (citoplazmatski protein) u novu epruvetu za zamrzavanje

9. Suspendirajte stanice s 5 puta većim volumenom suspendiranih čestica u izotoničkom puferu i dobro promiješajte

10. Centrifugirajte suspenziju stanica na 1500 o/min tijekom 5 minuta i uklonite supernatant

11. Suspendirajte čestice s 2/3 puta većim volumenom pufera za ekstrakciju

12. Stavite epruvetu na vibrirajući mikser, protresite i miješajte na 700 o/min 15 minuta, a zatim na 1400 o/min 15 minuta. Cijeli proces treba biti oprezan kako bi se izbjegla pjena

13. Centrifugirajte na 9400 okr/min 15 minuta, prenesite supernatant u novu zamrznutu epruvetu centrifuge nakon centrifugiranja na niskoj temperaturi

14. Podijelite na nekoliko dijelova i zamrznite tekućim dušikom te pohranite (dugotrajno skladištenje treba biti na - 80 ℃, kratkotrajno skladištenje treba biti na - 20 ℃)